Аннотацiя: |
Разработан протокол баллистической трансформации мягкой пшеницы, основанный на использование тканей зрелых семян в качестве эксплантов. Эмбриогенный каллус, полученный из тканей зрелых семян, трансформировали плазмидой psGFP-BAR, содержащей репортерный ген gfp и селективный ген bar.Показано влияние гормонального состава среды на эффективность трансформации тканей зрелых семян пшеницы. Использование ауксина 2,4-Д позволило получить трансгенные растения с частотой 0,75%, тогда как применение ауксина Дикамба для регенерации растений не привело к формированию трансформантов. Трансгенный статус растений, отобранных в результате экспериментов, подтвержден ПЦР- и ОЕ-ПЦР-анализом. Показано стабильное наследование трансгенных признаков в последующих поколенияхпшеницы (Т1, Т2), и получены гомозиготные растения, проявляющие высокую устойчивость при обработке гербицидом. Разработанный протокол позволяет упростить процесс трансформации пшеницы для получения трансгенных форм с новыми признаками. |