Аннотацiя: |
Использованы два способа выделения и очистки противоопухолевого фермента L-лизин-а-оксидазы из культуры гриба триходермы. Согласно первому из них, сопутствующие белки отделяли от культуральной среды добавлением 15%-ного раствора сульфата аммония, фермент осаждали при 70% -ной концентрации сульфата аммония, фракцию концентрировали от обьема 55 л до 1,5 л путем ультрафильтрации. Затем проводили очистку с использованием сорбентов ДЕАЕ-сефацела, сефадекса G-100 и G-200, в результате чего удельная активность фермента L-лизин-а-оксидазы повысилась от 4 до 200 ед/мг. Другой способ выделения очистки фермента состоял в последовательной 4-ступенчатой мембранной фильтрации (поры от 0,2 мкм до размера, обеспечивающего происхождение белка массой 30 кДа). Чистоту препарата проверяли методом капилярного электрофореза. В результате обеих процедур получен фермент с удельной активностью 50 ед/мг белка. |