Сайт бібліотеки  >  Електронний каталог  >  Опис документа

Опис документа

Горбатюк О. Б., Окунєв О. В., Ніколаєв Ю. С., Святенко О. В., Кордюм В. А.
Конструювання, синтез, функціональна характеристика і практичне застосування злитого білка SPA-ВAPmut

Вид документа:  Складова частина документа 
Мова:  Англійська  Обсяг:  С. 49-54 
УДК:  579.69+577.112 

Аннотацiя:

Створення генно-інженерного злитого білка SPA-BAPmut та його застосування як вторинного імунореагенту в імунологічних тестах. Методи. Клонування генів, ПЛР, секвенування ДНК, культивування бактерій, електрофорез, синтез і очищення білків, ELISA, вестерн-блот. Результати. З використанням послідовновностей ДНК, що кодують білок А Staphylococcus aureus (SPA) і бактерійну лужну фосфатазу з покращеними каталітичними властивостями (BAPmut), сконструйовано ген злитого білка SPA-BAPmut та забезпечено його препаративне отримання у розчинній формі внаслідок синтезу в клітинах Escherichia coli. Визначено умови ферментації, за яких вихід SPA-ВAPmut становить приблизно 1 г/л культури E. coli. Із застосуванням методу металоафінної хроматографії одержаноцільовий білок з чистотою понад 95 %. SPA-ВAPmut термостабільний, а обидва його компоненти (SPA і ВAPmut) зберігають імуноглобулінзв’язувальну і фосфатазну активність тривалий час. SPA-BAPmut дозволяє виявляти щонайменше 5 нг антигену та 1 мкг/мл антитіл. Висновки. Показано можливість використання SPA-ВAPmut як універсального вторинного імунореагенту в імунохімічних тестах.

Є складовою частиною документа Biopolymers & Cell = Биополимеры и клетка [Текст] = Биополимеры и клетка = Біополімери і клітина : наук. журн. 29. № 1 / засн. : НАН України, Ін-т молекулярної біології і генетики. — К. : Наук. думка, 2013.