| Аннотацiя: |
Дисертація присвячена отриманню штамів дріжджів Saccharomyces cerevisiae з підвищеною продукцією етанолу або гліцеролу під час алкогольної ферментації. Для покращення продукції етанолу було вирішено знизити вміст АТФ в клітинах дріжджів за рахунок індукції футильних циклів або експресії ферментів, що здатні гідролізувати АТФ. Зокрема, було протестовано такі підходи: посилення експресії нативного гена РНО8; експресії гена ару Е. coli; експресія гену fbp1 E. coli; посилення експресії гена PYC2 S. cerevisiae і введення в геном гена рскА E. coli; посилення експресії генів TPS1 і NTH1; експресія вкороченого гена РНО8. Всі перелічені способи, крім двох останніх, давали змогу отримати рекомбінантні штами S. cerevisiae з підвищеною ефективністю алкогольної ферментації. Експресію нативного гена РНО8, що кодує вакуолярну форму лужної фосфатази, було здійснено також в штамі AS400, що використовується для промислового виробництва етанолу, і при цьому досягнено підвищення продукції етанолу на 6%. Для покращення продуктів гліцеролу було отримано штам S. cerevisiae зі зниженою активністю тріозофосфатізомерази; надекспресією злитого гена GPD1-GPP2fus, що кодує химерний білок з гліцерол-3-фосфатдегідрогеназою та гліцерол-3-фосфатфосфатазною активністю; експресією вкороченого гена FPS1m, що кодує модифіковану форму аквагліцепорину Fps1 і вкороченого гена ILV2, що кодує цитозольну форму ферменту ацетолактатсинтази. Цей штам продукував у 9 або в 4,7 більше гліцеролу, ніж штам дикого типу, під час ферментації, відповідно, в мікроаеробних або анаеробних умовах. |
